用双抗体夹心酶免疫分析法。将TNF α单克隆抗体包被于PVC板上，样品种的TNF α和单抗体结合后再与辣根过氧化物酶标记免抗TNFα多克隆抗体结合，过氧化物酶与TMB反应终止后用酶标仪测定450nm的光密度，结果与标准曲线比较确定TNFα的含量。